一种简单的原代神经元培养及转染方法

作者：甘娜; 尹飞; 彭镜; 吴丽文; 何芳; 陈晨

来源：广西医学, 2015, 37(03): 289-291.

DOI：10.11675/j.issn.0253-4304.2015.03.01

• 原代神经元
• 细胞培养
• 慢病毒转染

目的建立一种简单、高效、稳定的原代神经元培养及转染方法。方法无菌条件下分离生后2 d内SD大鼠海马,经消化、反复沉淀后获得海马组织细胞悬液,利用差速贴壁法对神经元进行纯化,采用神经元专用无血清培基进行培养,并于倒置显微镜下观察神经元形态的变化,采用微管相关蛋白(MAP2)抗体对细胞进行鉴定;利用慢病毒转染神经元,观察神经元转染效率。结果体外培养的原代神经元,在培养第1015天可以形成密集的神经元网络,细胞健壮,神经元特征明显;经MAP2鉴定,神经元纯度达95%以上;利用慢病毒转染神经元,转染效率达95%以上。结论采用该方法进行原代神经元培养,能够获得高纯度的原代神经元;慢病毒是神经元转染的理想载体。

• 单位
  中南大学湘雅医院; 广西卫生职业技术学院