摘要

目的探讨PKC信号通路在七氟醚预处理减轻心肌细胞缺氧复氧损伤中的作用。方法取对数生长期H9c2心肌细胞,随机分成5组。空白对照组(Sham组)不进行任何处理;缺氧/复氧组(H/R组)细胞缺氧2 h后复氧1 h;七氟醚预处理延迟性保护组(SWOP组)2.5%七氟醚预处理20 min后同H/R组;PKC信号通路抑制剂组(CHE组)培养基内加入终浓度为10μmol/L白屈菜赤碱培养1 h后,再同H/R组;CHE+SWOP组2.5%七氟醚预处理前15 min在培养基内加入终浓度为10μmol/L白屈菜赤碱,再同H/R组。取缺氧复氧末的心肌细胞,检测心肌细胞存活率,检测还原型谷胱甘肽(GSH)和丙二醛(MDA)含量,荧光探针二氢乙啶测定心肌细胞内活性氧自由基(ROS)含量,Western blot法检测抗氧化应激相关蛋白Nrf2及凋亡蛋白Caspase-3的表达。结果与Sham组比较,H/R组H9c2心肌细胞的存活率均降低,GSH值减少,MDA、ROS、Nrf2及Caspase-3值增加(P<0.05)。与H/R组相比,SWOP组细胞存活率增加,GSH、Nrf2值增加,MDA、ROS、Caspase-3值降低(P<0.05);CHE组细胞存活率降低,GSH、Nrf2值降低,MDA、ROS、Caspase-3值增加(P<0.05);与SWPO组相比,CHE+SWOP组心肌细胞存活率降低,Nrf2、GSH值降低,MDA、ROS、Caspase-3值增加(P<0.05)。结论七氟醚预处理可减轻心肌细胞缺氧复氧损伤,PKC信号通路可能参与了心肌细胞缺氧复氧时抗氧化应激的保护作用。

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