瑞香素调节AMPK/mTOR信号通路对IL-1β诱导的关节软骨细胞自噬和凋亡的影响

作者：冷雨; 李清山; 何克; 李善武

来源：河北医药, 2023, 45(22): 3365-3376.

• 瑞香素
• 腺苷酸活化蛋白激酶/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白信号通路
• 关节软骨细胞
• 自噬
• 凋亡

目的 探究瑞香素(DAP)调节腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)信号通路对白介素-1β(IL-1β)诱导的关节软骨细胞自噬和凋亡的影响。方法 将大鼠关节软骨细胞随机分为对照组(Control组，空白培养基处理)、模型组(Model组，10 ng/ml IL-1β)、低浓度DAP组(DAP-L组，10 ng/ml IL-1β+30 mg/L DAP)、高浓度DAP组(DAP-H组，10 ng/ml IL-1β+60 mg/L DAP)、高浓度DAP+AMPK抑制剂Compound C组(DAP-H+CC组，10 ng/ml IL-1β+60 mg/L DAP+10μmol/L CC)。CCK-8法检测细胞增殖能力。ELISA法测定细胞上清液肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)水平。流式细胞术测定细胞凋亡率。实时荧光定量PCR检测细胞中AMPK、mTOR mRNA的表达。Western Blot法检测细胞中AMPK/mTOR信号通路相关蛋白、凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax、自噬相关蛋白Beclin-1、LC3的表达。单丹磺酰戊二胺(MDC)荧光染色观察细胞自噬。结果 与Control组比较，Model组关节软骨细胞OD450值(48、72 h)、AMPK mRNA表达和蛋白磷酸化水平、Bcl-2、Beclin-1、LC3Ⅱ/Ⅰ蛋白表达、MDC阳性细胞比例显著下降(P<0.05),细胞凋亡率、炎性因子TNF-α、IL-6水平、mTOR mRNA表达和蛋白磷酸化水平、Bax蛋白表达显著上升(P<0.05)。与Model组比较，DAP-H组关节软骨细胞相关指标变化与上述相反(P<0.05)。Compound C减弱了DAP对IL-1β诱导的关节软骨细胞自噬的促进作用，促进了细胞凋亡。结论 DAP可能通过激活AMPK/mTOR信号通路促进IL-1β诱导的关节软骨细胞自噬，抑制细胞凋亡。

• 单位
  遂宁市中心医院