线粒体钙离子单向转运蛋白对丁酸钠抗结直肠癌的作用及机制

作者：秦勇; 孙小蝶; 刘璐琳; 卞中博; 张秋玉; 孙素霞

来源：中华肿瘤防治杂志, 2022, 29(20): 1467-1474.

DOI：10.16073/j.cnki.cjcpt.2022.20.05

• NaB
• CRC
• MCU
• ROS
• 自噬
• 凋亡

目的 探讨线粒体钙离子单向转运蛋白（MCU）在丁酸钠（NaB）抗结直肠癌（CRC）中的作用及可能机制。方法 单独用0、0.5、1.0、2.0、5.0和10.0 mmol/L NaB处理CRC HCT-116细胞24 h, MTT检测细胞活力。分别用50μmol/L自噬抑制剂氯喹（CQ）、30μmol/L凋亡抑制剂Z-VAD-FMK、30μmol/L坏死抑制剂Necrostatin-1、2 mmol/L活性氧（ROS）拮抗剂N-乙酰半胱氨酸（NAC）、0.5 mmol/L精胺（Sp）和钌红（RR）预处理HCT-116细胞1 h,再给予5 mmol/L NaB处理24 h, MTT检测细胞活力，Hoechst染色法检测细胞凋亡，单丹磺酰尸胺（MDC）染色法检测细胞自噬，荧光探针2′,7′-二氯二氢荧光素二乙酸酯（DCFH-DA）检测细胞ROS含量，RT-PCR检测MCU mRNA水平，蛋白质印迹检测细胞MCU、p62、LC3-Ⅱ和PARP剪切体c-PARP蛋白水平。结果 MTT结果显示，对照组细胞存活率为（100.00±6.79）%,NaB组为（43.99±2.63）%,t=7.219,PNaB=8.846,FNAC=28.994,FNaB×NAC=6.220,均PNaB=34.512,FNAC=6.398,FNaB×NAC=5.964,均PNaB=36.763,FNAC=3.376,FNaB×NAC=15.975,PNaBNaB×NACNAC>0.05。RR预处理后蛋白质印迹实验析因设计结果显示，NaB组p62蛋白相对表达量为0.49±0.12,RR组为1.75±0.22,NaB+RR组为0.72±0.06,FNaB=54.538,FRR=19.903,FNaB×RR=5.410,均PNaB=8.974,FRR=0.008,FNaB×RR=10.311,PRR>0.05,PNaBNaB×RRNaB=6.846,FRR=5.133,FNaB×RR=7.298,PNaBNaB×RRRR>0.05。结论 NaB可通过MCU诱导CRC细胞产生ROS抑制细胞增殖，并促发自噬和凋亡。

• 单位
  公共卫生学院; 南方医科大学