磷脂酰丝氨酸合成酶基因的克隆及在枯草芽孢杆菌中的表达

作者：张业尼; 路福平; 李玉; 王建玲; 李静文

来源：中国生物工程杂志, 2008, (09): 56-60.

DOI：10.13523/j.cb.20080910

• 磷脂酰丝氨酸合成酶
• 枯草芽孢杆菌
• 异源表达
• 酶联比色法

应用PCR技术从Escherichia coli K12 Sgal-(ExPASy P23830)中扩增到大小为1350bp编码磷脂酰丝氨酸合成酶的DNA片段,将其插入枯草芽孢杆菌诱导型表达载体pBES,获得重组质粒pBES-pss后转化Bacillus subtilis DB104。经蔗糖诱导后,该磷脂酰丝氨酸合成酶在Bacillus subtilis DB104(pBES-pss)中获得胞外分泌表达,SDS-PAGE分析发现目的蛋白分子量约为52kDa,酶联比色法检测酶活力为1.50U/ml,提高了磷脂酰丝氨酸合成酶的表达产量,为工业化发酵生产磷脂酰丝氨酸合成酶奠定了良好的基础。

• 单位
  生物工程学院; 天津科技大学