桔小实蝇细胞凋亡基因hid的克隆及不同发育阶段表达分析

作者：蔡玉音; 武强; 刘桂清; 吕志创; 李建伟; 张桂芬; 万方浩

来源：昆虫学报, 2014, 57(06): 673-680.

DOI：10.16380/j.kcxb.2014.06.002

• 桔小实蝇
• 细胞凋亡基因
• 分子克隆
• 序列分析
• 实时荧光定量PCR

【目的】细胞凋亡是一个细胞自动结束生命的过程,也称为程序性细胞死亡(programmed cell death,PCD)。头部退化缺陷基因(head involution defective,hid)是昆虫细胞凋亡基因RHG家族的成员,该家族基因通过克服凋亡蛋白抑制因子(inhibitor of apoptosis proteins,IAPs)的保护作用来保证PCD的发生。本研究旨在克隆和分析桔小实蝇Bactrocera dorsalis的hid基因,并研究其在各发育阶段的表达情况。【方法】利用RT-PCR和RACE技术获得了桔小实蝇hid基因的cDNA全长序列。利用荧光定量PCR对hid基因在桔小实蝇不同发育阶段的转录水平进行分析。【结果】克隆获得桔小实蝇hid cDNA序列,将其命名为Bdhid(GenBank登录号为KJ461670),其开放阅读框长1 029 bp,编码342个氨基酸。氨基酸序列分析显示其具有一个短的N-端肽基元(IAP-binding-motif,IBM)和C-端Grim Helix 3(GH3)结构域,与其他已知的双翅目昆虫hid基因有较高的同源性。实时荧光定量PCR检测结果表明,该基因在桔小实蝇的幼虫期表达水平较低,蛹期及成虫期表达量显著升高。【结论】这些结果为进一步研究hid基因在桔小实蝇细胞凋亡途径中的功能及其转基因条件致死品系的获得奠定了基础。

• 单位
  中国农业科学院植物保护研究所; 植物病虫害生物学国家重点实验室; 广东省昆虫研究所