鸭肝炎病毒Ⅰ型结构基因vp1的原核表达及其抗原性分析

作者：甘一迪; 刘家森; 姜骞; 孟庆文; 韩凌霞; 司昌德; 曲连东

来源：中国预防兽医学报, 2008, (08): 618-621.

• 鸭肝炎病毒Ⅰ型
• vp1基因
• 原核表达 duck hepatitis virus type 1
• vp1 gene
• prokaryotic expression

通过RT-PCR方法克隆出DHV-1:161/79/V结构蛋白vp1基因片段,将其克隆到pMD18-T载体中,测序结果为714bp。vp1经EcoRⅠ和XhoⅠ双酶切后,亚克隆到原核表达载体pET-32a(+),获得重组质粒pET-VP1,转入E.coli Rosetta-gami(DE3) pLysS,经IPTG诱导,SDS-PAGE检测结果表明在大肠杆菌中表达了1个相对分子量约为47ku的融合蛋白(Trx-His-VP1),将此融合蛋白用His-Ni+亲和层析法进行纯化。Western blot分析表明,Trx-His-VP1能与DHV-1阳性血清发生特异性反应,说明表达的结构蛋白VP1具...