二氢青蒿素通过诱导铁死亡抑制肝癌细胞生长

作者：李艳纯; 周怡; 王鑫; 王旭; 陈素峰; 王莹^*; 杜璟^*

来源：中国生物化学与分子生物学报, 2019, 35(12): 1361-1366.

DOI：10.13865/j.cnki.cjbmb.2019.10.1188

• 二氢青蒿素
• 肝癌
• 铁死亡
• 脂质过氧化物

二氢青蒿素(dihydroartemisinin,DHA)是青蒿素的一种衍生物,在多种肿瘤中表现出明显的抗肿瘤活性,但其具体机制不详。本文探讨了DHA对肝癌细胞的毒性作用机制。利用CCK-8试剂检测DHA对肝癌细胞株活力的影响,通过荧光探针染色及流式细胞术分析细胞内ROS及脂质过氧化物水平的变化;通过谷胱甘肽测定试剂盒检测细胞内还原型谷胱甘肽含量的变化,并通过免疫印迹分析DHA作用下细胞内铁死亡通路蛋白质中GPX4的变化。结果发现,DHA能显著抑制SMMC-7721及Huh-7细胞活力,其半数抑制浓度分别为2374μmol/L及2692μmol/L。在35μmol/L DHA处理下,SMMC-7721及Huh-7细胞内ROS分别升高26倍和21倍,脂质过氧化物升高23倍和17倍。DHA可诱导细胞内GSH含量下降,并能下调铁死亡相关蛋白质GPX4蛋白水平。通过利用小分子抑制剂进行功能恢复实验发现,ROS抑制剂、铁螯合剂及铁死亡抑制剂都可不同程度恢复DHA引起的细胞活力下降。进一步检测发现,铁死亡抑制剂可抑制DHA诱导的脂质过氧化,并恢复GSH含量及GPX4蛋白水平。结果表明,在肝癌细胞中,DHA可通过诱导细胞发生铁死亡抑制肝癌细胞生长。

• 单位
  浙江中医药大学; 临床医学研究所; 浙江省人民医院; 第二临床医学院