半滑舌鳎黏蛋白样蛋白基因克隆及其组织分布和时序表达

作者：金歌; 费金鹏; 胡秀彩; 谭静; 吕爱军^*; 孙敬锋

来源：水产学杂志, 2022, 35(04): 19-26.

• 半滑舌鳎
• MLP
• 基因克隆
• 组织分布
• 时序表达

以创伤弧菌(Vibrio vulnificus)ST-6菌株腹腔注射半滑舌鳎(Cynoglossus semilaevis)为研究对象,采用RT-PCR方法扩增、克隆半滑舌鳎黏蛋白样蛋白(CsMLP)基因及其序列,利用实时荧光定量PCR技术研究CsMLP基因的组织分布和创伤弧菌感染后在皮肤中的时序表达水平。结果表明:CsMLP基因片段长度为2 989bp,推测编码996氨基酸(aa),含有VWD(98～273 aa)、C8(318～379 aa)和CK(908～982 aa)3个黏蛋白特异性结构域。氨基酸序列同源性分析结果表明,半滑舌鳎CsMLP与黄金鲈(Perca flavescens)、石斑鱼(Epinephelus lanceolatus)、斑马鱼(Danio rerio)、非洲爪蟾(Xenopus laevis)和人(Homo sapiens)的序列同源性分别为56.18%、44.07%、33.15%、26.91%和22.63%。CsMLP基因在鳃和皮肤表达水平较高,在脾脏、肠道和肝脏中表达水平较低;CsMLP在创伤弧菌感染皮肤12 h后显著性上调表达,36 h后显著性下调表达。本结果为半滑舌鳎黏蛋白功能及其黏膜免疫应答机制研究提供参考。

• 单位
  天津农学院