Carabin过表达对人心室肌细胞AC16氧糖剥夺后凋亡的影响

作者：吴庆; 姚浩旗; 程阔菊; 唐建芳; 黄河; 陈建; 李洪; 杨天德^*

来源：第三军医大学学报, 2018, 40(22): 2068-2073.

DOI：10.16016/j.1000-5404.201807146

• 人心室肌AC16细胞
• Carabin
• 氧糖剥夺
• 细胞凋亡

目的探讨Carabin基因过表达对氧糖剥夺(oxygen glucose deprivation,OGD)诱导的人心室肌细胞株AC16凋亡的作用。方法构建Carabin过表达及空载稳定细胞株,将AC16细胞分为空载常氧组、Carabin过表达常氧组、空载OGD 24 h组和Carabin过表达OGD 24 h组。空载常氧组及Carabin过表达常氧组置于正常条件下培养;空载OGD 24 h组和Carabin过表达OGD 24 h组置于Hanks液中放入缺氧恒温细胞培养箱培养24 h(1%O2-5%CO2-94%N2)。采用倒置显微镜观察细胞形态变化;流式细胞术检测心肌细胞凋亡率及存活率; TUNEL染色检测细胞凋亡情况;通过酶标仪检测心肌细胞凋亡蛋白酶Caspase-3和心肌细胞损伤标志物LDH的活性; Western blot检测细胞凋亡蛋白Caspase-3的表达水平。结果 AC16细胞OGD 24 h后,细胞内Carabin的mRNA及蛋白水平显著降低。与空载常氧组比较,空载OGD 24 h组及Carabin过表达OGD 24 h组的细胞凋亡率、Caspase-3活性、LDH活性及Caspase-3蛋白表达水平均显著升高(P <0. 05)。与空载OGD 24 h组比较,Carabin过表达OGD 24 h组的细胞凋亡率、Caspase-3活性、LDH活性及Caspase-3蛋白表达水平显著降低(P <0. 05)。结论 Carabin过表达能显著减轻OGD诱导后AC16细胞的凋亡。

• 单位
  第三军医大学; 达州市中西医结合医院; 中国人民解放军陆军军医大学; 重庆医科大学附属第二医院