人干扰素诱导跨膜蛋白基因实时荧光定量PCR检测方法的建立

作者:袁森; 田明尧; 崔鹤馨; 靖杰; 刘昊; 刘存霞; 任静强; 姜庆利; 薛斐; 金宁一
来源:中国生物制品学杂志, 2013, (05): 710-716+725.
DOI:10.13200/j.cjb.2013.05.131.yuans.028

摘要

目的建立人干扰素诱导跨膜蛋白(Interferon induced transmembrane protein,IFITM)1、2、3基因实时荧光定量PCR检测方法。方法根据GenBank中登录的人IFITM1、2、3及β-actin基因序列,分别设计4对特异性引物,以质粒pVAX1-IFITM1、2、3和pMD18-T-β-actin为模板,分别进行PCR及实时荧光定量PCR扩增,优化实时荧光定量PCR反应体系及反应条件,绘制标准曲线及扩增曲线,建立实时荧光定量PCR检测方法,并验证该方法的重复性、灵敏度及特异性。结果各质粒的PCR及实时荧光定量PCR产物经琼脂糖凝胶电泳分析,均可见大小与理...

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