摘要

目的观察针刺加亚低温对脑缺血再灌注损伤(CIRI)大鼠缺血侧海马组织mi RNA归属通路及mir-34c-5p表达的影响,探讨mir-34c-5p在CIRI中的作用机制。方法将60只SPF级健康SD大鼠随机分为正常组、假手术组、模型组、针穴组、亚低温组和针刺加亚低温组,每组10只。采用线栓法制备大鼠大脑中动脉闭塞(MCAO)模型,造模成功后约2 h且大鼠生命体征稳定后进行干预。针穴组选取"人中""百会""大椎"进行针刺,1次/12 h,共6次;亚低温组连续72 h放入低温代谢笼中,保持肛温(33±1)℃、鼓膜温度(31±1)℃;针刺加亚低温组同时采用针刺与亚低温进行干预。实验结束后,观察大鼠神经功能缺损评分和脑梗死面积,采用mi RNA微阵列芯片技术筛选出组间差异基因并归纳信号传导通路,实时定量PCR检测缺血侧海马组织mir-34c-5p的表达。结果与正常组、假手术组比较,模型组大鼠神经功能缺损评分升高,脑梗死面积比明显增加(P<0.01),差异表达mi RNA数量分别为4、5个,且主要归属MAPK、p53、Calcium、Jak-STAT及Neurotrophin信号通路,mir-34c-5p表达量明显降低(P<0.05);与模型组比较,各干预组大鼠神经功能缺损评分降低,脑梗死面积比明显减少(P<0.05,P<0.01),但干预组间比较差异无统计学意义(P>0.05),针穴组、亚低温组、针刺加亚低温组差异表达mi RNA数量分别为16、7、23个,且主要归属MAPK、p53、Calcium、Jak-STAT及Neurotrophin信号通路,各干预组上调mir-34c-5p表达趋势较明显(P<0.01);与针穴组、亚低温组比较,针刺加亚低温组大鼠mir-34c-5p表达量明显增加(P<0.05)。结论针刺加亚低温可降低CIRI大鼠神经功能缺损评分,减少脑梗死面积,其机制可能是针刺加亚低温可靶向多条信号转导通路,从多途径、多网络调控CIRI,并与上调mir-34c-5p的表达量有关,从而发挥神经保护作用。