摘要
目的了解间充质干细胞(MSC)分化为内皮细胞的可能的调控机制,以促进其在未来临床实践中的应用。研究目标是脐带来源的间充质干细胞分化成内皮细胞的可行性,以及探索miRNAs在其分化过程中如何发挥调控作用。方法从脐带的华氏胶组织中分离出间充质干细胞,并使用分化试剂盒分化成内皮细胞。流式细胞仪用于鉴定内皮细胞的分化标记。利用Western blot和实时PCR(RT-PCR)检测内皮细胞标志物的蛋白质和mRNA表达。使用生物信息学预测调控CD31或von Willebrand(vWF)因子的miRNAs。在MSC分化的不同阶段,使用RT-PCR测量这些miRNAs在细胞中的水平。并使用双荧光素酶报告实验验证了它们靶向CD31或vWF的3’UTR的能力。结果脐带间充质干细胞能够分化成内皮细胞。分化9 d后,miR-26a-5p、miR-24-3p、miR-15b-5p、miR-497-5p、miR-214-3p、miR-195-5p、miR-761、miR-335-5p和miR-16-5p的水平与未分化的MSCs相比有所下调,而miR-15a-5p和miR-195-5p的水平则没有统计学差异。双荧光素酶报告实验证实,miR-26a-5p靶向CD31的3’UTR,miR-761、miR-335-5p和miR-16-5p靶向vWF的3’UTR。结论 MiRNAs可能在间充质干细胞分化为内皮细胞的过程中发挥重要作用。
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单位厦门医学院