外周血中5-羟色胺通过诱导中性粒细胞胞外诱捕网生成加重脓毒症小鼠肺损伤

作者：黄雨朦; 姬倩; 朱艳艳; 刘大东; 付胜巧; 王旭; 邰宁正^*

来源：中华危重病急救医学, 2021, 33(12).

• 脓毒症
• 5-羟色胺
• 中性粒细胞胞外诱捕网
• 肺损伤

目的观察外周5-羟色胺(5-HT)诱导中性粒细胞胞外诱捕网(NET)的生成对脓毒症小鼠肺损伤的影响。方法选择6～8周龄野生型(WT型)和Tph1基因敲除(Tph1KO)C57小鼠, 按随机数字表法分为WT小鼠假手术组、WT小鼠脓毒症组和Tph1KO小鼠假手术组、Tph1KO小鼠脓毒症组。假手术组小鼠接受假手术处理(仅打开腹腔翻动盲肠但不结扎和穿刺, 然后关腹);脓毒症组小鼠接受盲肠结扎穿孔术(CLP)建立脓毒症模型。术后12 h处死小鼠, 采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测小鼠支气管肺泡灌洗液(BALF)中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白细胞介素-6(IL-6)含量;同时收集小鼠肺组织标本, 光镜下观察肺组织病理学改变, 采用免疫荧光显微镜观察小鼠肺组织中NET生成情况。结果病理学结果提示:假手术组小鼠肺组织结构完好, 未见渗出;而脓毒症组小鼠肺泡结构破坏, 肺泡腔内可见明显渗出, 肺泡壁增厚并伴有大量炎性细胞浸润, 且WT小鼠脓毒症组肺损伤程度较Tph1KO小鼠脓毒症组严重。ELISA结果显示:不同品系假手术组小鼠BALF中TNF-α和IL-6含量比较差异无统计学意义;而脓毒症组小鼠BALF中TNF-α和IL-6含量均较假手术组明显升高〔WT小鼠:TNF-α(μg/L)为158.20±28.46比14.00±3.28, IL-6(μg/L)为304.98±21.78比57.70±12.30;Tph1KO小鼠:TNF-α(μg/L)为85.88±20.13比14.95±1.53, IL-6(μg/L)为169.50±45.61比55.05±12.68, 均P<0.01〕, 且WT小鼠脓毒症组上述指标水平均明显高于Tph1KO小鼠脓毒症组〔TNF-α(μg/L):158.20±28.46比85.88±20.13, IL-6(μg /L):304.98±21.78比169.50±45.61, 均P<0.01〕。免疫荧光染色显示:假手术组小鼠肺脏中均检测到极少量的NET生成;而脓毒症组小鼠肺组织中均检测到大量的NET生成, 明显高于假手术组〔WT小鼠:(34.75±7.27)%比(1.75±0.96)%, Tph1KO小鼠:(14.25±5.74)%比(2.50±1.29)%, 均P<0.01〕, 且WT小鼠脓毒症组小鼠肺脏组织中NET生成量较Tph1KO小鼠脓毒症组明显增多〔(34.75±7.27)%比(14.25±5.74)%, P<0.01〕。结论脓毒症时, 小鼠肺组织中炎性因子产生增加导致肺损伤, 其机制与外周5-HT介导的肺组织中NET的生成增加有关;抑制外周血中5-HT的产生可有效减少肺组织中NET生成, 从而减轻肺损伤。

• 单位
  江苏大学; 江苏大学附属医院