马尔堡病毒糖蛋白GP1亚基的真核表达与纯化

作者：张冠英; 迟象阳; 范鹏飞; 房婷; 吴诗坡; 陈旖; 王美荣; 陈郑珊; 于长明; 陈薇

来源：生物技术通讯, 2018, 29(01): 17-20.

• 马尔堡病毒
• 糖蛋白
• GP1亚基
• Expi293细胞

目的:用真核表达系统可溶性表达重组马尔堡病毒糖蛋白GP1亚基并纯化。方法:从糖蛋白(GP)全长基因上扩增GP1基因序列,克隆至真核表达载体pcDNA3.4,在哺乳动物表达系统中进行表达,镍柱亲和层析纯化目的蛋白,ELISA检测重组蛋白与特异抗体的免疫反应性。结果:GP1在哺乳动物表达系统中获得可溶性表达,纯化得到的目的蛋白与特异抗体具有良好的结合活性,推测其构象与天然马尔堡病毒GP1具有相似性。结论:真核表达了马尔堡病毒糖蛋白GP1亚基,且目的蛋白具有良好的抗原性,可用于GP特异抗体筛选、疫苗效果评价等研究。