摘要

目的研究外用中药清热除湿凝胶对人乳头瘤病毒(HPV)16阳性的宫颈癌荷瘤小鼠线粒体凋亡蛋白的影响。方法培养HPV16阳性人宫颈癌SiHa细胞株,制成浓度为2×107/mL的细胞悬液。选取5周龄雌性裸小鼠,用1 m L注射器抽取充分混匀的细胞悬液,注入裸小鼠右前腿外上方皮下,造成HPV16阳性移植瘤模型。造模成功后采用随机数字表法将荷瘤小鼠分为5组,每组10只。即模型组、卡波姆940组、中药组、顺铂组及联合用药组。中药组于成瘤部位给予清热除湿凝胶外涂(每天每50 mm3瘤体体积外涂凝胶0.3 mL);顺铂组:将10 mg顺铂溶于66.7 m L生理盐水中制成顺铂注射液腹腔注射(每10 g体重注射0.2 mL,每3天注射1次);卡波姆940组(凝胶中辅料):卡波姆940外涂(每天每50 mm3体积外涂0.15 mL);联合用药组:同时给予中药外涂和顺铂腹腔注射,各组共给药28 d。而后麻醉剥取小鼠右前腿肿瘤组织,免疫荧光法进行检测细胞凋亡,同时Western blot法检测组织中凋亡相关蛋白Bax、Bcl-2、Caspase-9、Caspase-3。结果与模型组、卡波姆940组比较,中药组、顺铂组、联合用药组细胞凋亡率均有升高,以联合用药凋亡率最高,差异有统计学意义(P <0.05);而卡波姆940组与模型组细胞凋亡率比较,差异无统计学意义(P> 0.05)。与模型组、卡波姆940组比较,中药组、顺铂组、联合用药组Bax、Caspase-3表达均上调,Bcl-2表达均下降,且联合用药组表达最明显,差异有统计学意义(P <0.05)。与模型组、卡波姆940组比较,顺铂组、联合用药组Caspase-9表达上调,差异有统计学意义(P <0.05)。结论清热除湿凝胶能改变HPV16阳性的宫颈癌荷瘤小鼠的细胞凋亡,该外用药发挥抗毒抑瘤作用的机制可能与上调肿瘤组织线粒体凋亡相关蛋白Bax、Caspase-9、Caspase-3,下调Bcl-2有关。