摘要
目的:探讨miR-204-5p对高糖(HG)诱导的人肾小管上皮细胞HK-2炎性因子和纤维化因子表达影响及可能机制。方法:体外培养HK-2细胞,分为对照组(Con组)、高糖组(HG组)、HG+NC-mimics组、HG+miR-204-5p mimics组、HG+anti-NC组、HG+anti-miR-204-5p组、HG+pcDNA-LDLR组和HG+miR-204-5p-mimics+pcDNA-LDLR组,RT-qPCR法检测细胞中miR-204-5p表达水平,试剂盒检测IL-6和TNF-α水平,Western Blot法检测细胞中LDLR、α-SMA和Fibronectin蛋白表达水平。双荧光素酶报告基因实验验证miR-204-5p与LDLR靶向调控关系。结果:与Con组比较,HG组HK-2细胞中miR-204-5p表达降低(P<0.05),IL-6和TNF-α水平升高(P<0.05),LDLR、α-SMA和Fibronectin的蛋白表达升高(P<0.05)。与HG+NC-mimics组比较,HG+miR-204-5p mimics组HK-2细胞中IL-6和TNF-α水平降低(P<0.05),α-SMA和Fibronectin的蛋白表达降低(P<0.05)。与HG+anti-NC组比较,HG+anti-miR-204-5p组HK-2细胞中IL-6和TNF-α水平升高(P<0.05),α-SMA和Fibronectin的蛋白表达升高(P<0.05)。miR-204-5p靶向负调控LDLR蛋白表达。与HG组比较,HG+pcDNA-LDLR组HK-2细胞中LDLR、α-SMA和Fibronectin蛋白表达升高(P<0.05),IL-6和TNF-α水平升高(P<0.05)。与HG+miR-204-5p-mimics组比较,HG+miR-204-5p-mimics+pcDNA-LDLR组HK-2细胞中IL-6和TNF-α水平升高(P<0.05),α-SMA和Fibronectin的蛋白表达升高(P<0.05)。结论:miR-204-5p可能通过靶向下调LDLR表达抑制HG诱导的HK-2细胞炎症因子和纤维化因子表达。
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