AGGF1调控AMPK-mTOR-ULK1信号通路促进视网膜血管生成机制研究

作者：李蓉^*; 姚国敏; 周凌霄; 闫瑾; 张敏; 李亚

来源：河北医药, 2022, 44(22): 3365-3369.

• AGGF1
• 自噬
• AMPK-mTOR-ULK1
• 血管生成
• 视网膜血管内皮细胞

目的 研究G补缀FHA域血管生成因子1(AGGF1)对人视网膜血管内皮细胞(HRMECs)血管生成的影响及机制。方法 将体外培养的HRMECs随机分为对照组、AGGF1组和AMPK信号通路抑制剂Compound C+AGGF1组，对照组细胞在M199培养基中培养，AGGF1组细胞在M199培养基中加入0.5μg/ml AGGF1进行培养，Compound C+AGGF1组在M199培养基中加入5μmol/L Compound C及0.5μg/ml AGGF1进行培养。培养48 h,分别采用Transwell及Matrigel法检测细胞迁移和管腔形成，采用Western blotting法检测各组细胞的自噬关键信号通路蛋白AMPK、mTOR和ULK1的表达，采用可表达GFP-LC3B融合蛋白的质粒转染细胞，荧光显微镜下观察细胞内自噬的变化。结果 AGGF1组中细胞迁移数和管腔形成数均明显高于对照组和Compound C+AGGF1组(均P<0.001),Compound C+AGGF1组细胞迁移数和管腔形成数均高于对照组，差异均有统计学意义(P<0.01)。对照组、AGGF1组和Compound C+AGGF1组细胞中的AMPK、mTOR和ULK1蛋白表达差异均无统计学意义(P>0.05)。AGGF1组细胞中p-AMPK和p-ULK1值均明显高于对照组和Compound C+AGGF1组，差异均有统计学意义(P<0.01),AGGF1组细胞中p-mTOR值均明显低于对照组和Compound C+AGGF1组，差异均有统计学意义(P<0.05);Compound C+AGGF1组的p-AMPK和p-ULK1值均高于对照组(P<0.01),Compound C+AGGF1组的p-mTOR值低于对照组，差异有统计学意义(P<0.001)。对照组细胞中出现较弱的GFP-LC3B绿色荧光，AGGF1组绿色荧光明显强于对照组和Compound C+AGGF1组，自噬增强(P<0.001);Compound C+AGGF1组的绿色荧光强于对照组(P<0.05)。结论 AGGF1通过激活AMPK-mTOR-ULK1自噬信号通路促进视网膜微血管内皮细胞的血管生成。

• 单位
  西安医学院; 西安医学院第一附属医院