aFGF核转位序列的敲除后蛋白结构稳定性及促分裂活性的变化

作者:吕文天; 付士波; 彭菲; 吕喆; 顾加祥; 王志成; 李校堃; 龚守良
来源:中国实验诊断学, 2006, 10(10): 1122-1125.
DOI:10.3969/j.issn.1007-4287.2006.10.005

摘要

目的通过比较野生及重组人类酸性成纤维细胞生长因子(waFGF,raFGF)的蛋白结构稳定性、细胞增殖活性的影响,探讨核转位序列的敲除对aFGF促分裂活性的影响。方法Western-blot检测waFGF和raFGF两种蛋白结构稳定性;MTT法检测NIH3T3细胞增殖,即促细胞分裂活性;流式细胞术检测其对细胞周期的影响;同时,检验肝素(HS)对waFGF和raFGF有关生物学作用。结果waFGF的结构稳定性大于raFGF;细胞增殖实验表明,waFGF的促分裂活性大于raFGF,P<0.05。在肝素的参与下,waFGF和raFGF表现出更大的促分裂活性;结论与waFGF比,raFGF的结构稳定性小于waFGF,具有较弱的促分裂性,仍具有刺激DNA合成和细胞增殖的能力。肝素具有增强aFGF活性的作用,可作为aFGF体外实验中模仿机体内环境的辅助因子。

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