免疫抑制受体igsf 9基因敲除鼠的构建以及对肿瘤生长的影响

作者：孙爽; 刘祎璠; 李尊岭^*

来源：滨州医学院学报, 2021, 44(05): 321-326.

DOI：10.19739/j.cnki.issn1001-9510.2021.05.001

• 免疫抑制受体
• IGSF 9
• 基因敲除
• 肺癌细胞
• 免疫受体
• 酪氨酸抑制序列

目的构建免疫抑制受体igsf 9基因敲除小鼠模型,并探究该小鼠模型对肺癌细胞生长的影响。方法将Cas 9 mRNA和igsf 9-sg RNA显微注射到C57BL/6小鼠受精卵中,利用非同源重组修复引入突变,造成igsf 9基因蛋白移码突变、功能缺失;应用PCR和测序技术进行基因型鉴定。将2×106个Lewis肺癌细胞(LL/2)皮下接种到C57BL/6-igsf 9+/+和C57BL/6-igsf 9-/-小鼠皮下,每3天检测肿瘤大小,绘制肿瘤生长曲线;当肿瘤体积大于2 cm3时,在麻醉状态下处死小鼠,称肿瘤质量、流式细胞仪检测肿瘤组织各免疫细胞水平。结果 igsf 9基因4-9外显子区域出现了2 892 bp缺失,igsf 9基因发生移码突变,提前出现终止密码子,成功构建igsf 9基因敲除小鼠模型,而且该小鼠的体质量以及外周血、脾脏和骨髓中免疫细胞的比例未见明显差异。与C57BL/6-igsf 9+/+小鼠相比,C57BL/6-igsf 9-/-小鼠显著抑制肿瘤细胞的生长,肿瘤组织浸润,CD3+T细胞、CD3+/CD4+T细胞、CD3+/CD8+T细胞水平显著升高,B细胞、中性粒细胞和巨噬细胞数量未见明显变化。结论 C57BL/6小鼠敲除igsf 9基因表达能够促进肿瘤组织中T细胞的浸润或激活,从而抑制肿瘤生长。

• 单位
  滨州医学院; 基础医学院