小鼠抗人IgE单克隆抗体制备及鉴定

作者：续艳梅; 杨正根; 刘诗俐; 黄慧慧; 董文其^*

来源：细胞与分子免疫学杂志, 2020, 36(07): 640-644.

DOI：10.13423/j.cnki.cjcmi.009038

• IgE
• 免疫吸附剂
• 单克隆抗体

目的制备高特异性的小鼠抗人IgE单克隆抗体(mAb)作为候选免疫吸附剂。方法用重组人IgE重链2～4区(IgECε2-4)免疫BALB/c小鼠,经细胞融合后,用甲基纤维素半固体培养基法筛选杂交瘤细胞。用IgECε2-4包被酶标板,间接ELISA筛选阳性细胞株,用天然IgE、 IgG、 IgM、 IgA、 IgD包被酶标板,间接ELISA检测阳性杂交瘤细胞无血清培养上清与天然IgE的亲和性和特异性;将稳定分泌特异性抗IgE mAb的细胞株扩大培养,小鼠体内诱生腹水法制备mAb,检测腹水的效价和亲和力,利用mAb亚型鉴定试剂盒检测获得的mAb的亚型。结果经过5次细胞融合总共得到29株阳性杂交瘤细胞,有11株与天然IgE亲和性较强,有2株与其他免疫球蛋白几乎无交叉反应,分别为3E9和7B4。结论成功制备了小鼠抗人IgE mAb,该mAb具有高效价、较高亲和力和高特异性。

• 单位
  广州康盛生物科技有限公司; 南方医科大学