薯蓣皂苷对结肠癌奥沙利铂耐药细胞的作用及其机制

作者：周超熙; 李保坤; 马洪庆; 张建锋; 牛健; 于滨; 王贵英^*; 赵阳

来源：中华实验外科杂志, 2020, 37(09).

• 结肠癌
• 薯蓣皂苷
• 奥沙利铂
• 药物抵抗
• 分子机制

目的探讨薯蓣皂苷对耐奥沙利铂(L-OHP)的结肠癌细胞株HT-29/L-OHP影响及其机制。方法常规培养结肠癌细胞株HT-29、耐药细胞株HT-29/L-OHP。噻唑蓝(MTT)法检测0～72 h细胞活性。以5 μmol/L的薯蓣皂苷处理细胞后流式细胞术(FCM)检测细胞凋亡;划痕实验及Transwell小室实验检测细胞侵袭和迁移能力;实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)和蛋白质印迹法(Western blot)检测薯蓣皂苷干预48 h对HT-29/L-OHP细胞多药耐药基因1(MDR1)、肺耐药蛋白(LRP)、B细胞淋巴瘤/白血病-2(bcl-2)、bcl-2相关X蛋白(bax)、CXC趋化因子受体7(CXCR7)、基质金属蛋白酶(MMP)-2、Livin及半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶(Caspase)-3活性的影响。应用SPSS 25.0软件对数据进行ANOVA分析和t检验。结果 MTT结果显示, 薯蓣皂苷对HT-29、HT-29/L-OHP细胞有抑制作用, 呈时间-剂量依赖特征(P<0.05)。5 μmol/L的薯蓣皂苷处理后HT-29/L-OHP细胞凋亡率处理组为(19.05±2.99)%, 对照组为(9.07±2.84)%(t=5.928, P<0.01);处理组HT-29/L-OHP细胞迁移率为(50.45±10.77)%, 对照组(78.25±10.16)%(t=-4.599, P<0.01);处理组HT-29/L-OHP细胞穿膜数[(93.50±16.12)个], 对照组[(150.67±20.85)个, t=-5.313, P<0.01]。薯蓣皂苷处理后HT-29/L-OHP细胞中MDR1、bcl-2、CXCR7、MMP-2明显降低, bax增高(RT-qPCR结果:t=6.052、4.699、6.082、2.882、-5.215, P<0.05;Western blot结果:t=5.569、4.162、5.284、3.438、-4.299, P<0.05);LRP、Livin无明显变化(RT-qPCR结果:t=0.188、0.706, P>0.05;Western blot结果:t=0.184、0.188, P>0.05);HT-29/L-OHP细胞Caspase-3活性在处理组(1.63±0.33), 对照组(0.77±0.13)(t=5.939, P<0.01)。薯蓣皂苷与L-OHP联合应用对HT-29/L-OHP的抑制率为(71.42±7.83)%, L-OHP组为(35.90±7.51)%, 薯蓣皂苷组为(44.03±6.37)%(F=39.361, P<0.01)。结论薯蓣皂苷可能通过调节多种基因表达而减轻结肠癌细胞对L-OHP的耐药性。

• 单位
  河北医科大学第四医院; 河北医科大学第三医院