LOX-1对ox-LDL诱导的小鼠巨噬细胞MMP-9表达的影响

作者：刘佳佳; 边云飞; 肖传实; 张娜娜; 杨志明; 杨慧宇^*

来源：山西医科大学学报, 2018, 49(12): 1411-1414.

DOI：10.13753/j.issn.1007-6611.2018.12.001

• MMP-9
• LOX-1
• ox-LDL
• 巨噬细胞
• 动脉粥样硬化

目的观察LOX-1对ox-LDL诱导的小鼠巨噬细胞MMP-9表达的影响。方法体外培养小鼠单核巨噬细胞RAW264. 7,构建LOX-1小干扰RNA(LOX-1-siRNA),并用LOX-1-siRNA 0. 5μg、1μg、1. 5μg与脂质体转染剂(μl)比例为1∶1,1∶2,1∶3转染RAW264. 7细胞48 h,经荧光显微镜观察不同转染条件下的转染效率,并分别使用反转录-多聚酶反应(RTPCR)和Western blot的方法检测各组LOX-1的mRNA和蛋白表达水平并选取最佳转染比例。随机将RAW264. 7细胞分成4组:对照组、ox-LDL组、ox-LDL+LOX-1-siRNA组和p Genesil组;分别使用反转录-多聚酶反应(RT-PCR)和Western blot的方法检测各组MMP-9的mRNA和蛋白表达水平。结果 (1)LOX-1-siRNA1及LOX-1-siRNA2分别转染RAW264. 7细胞48 h,LOX-1-siRNA2抑制作用强于LOX-1-siRNA1。(2)用LOX-1-siRNA与脂质体转染剂不同比例转染RAW264. 7细胞48 h后,当LOX-1-siRNA量为1. 0μg、Lipofectamine2000的量为2μl时转染效率最高,与其余任一组相比差异有统计学意义(P <0. 05)。(3)与对照组比较,ox-LDL组MMP9 mRNA表达水平明显升高; ox-LDL+LOX-1-siRNA组与ox-LDL组比较MMP-9 mRNA表达明显减弱; p Genesil组MMP-9 mRNA表达与对照组比较差异无统计学意义。(4)与对照组相比,ox-LDL组MMP9蛋白表达明显增加; ox-LDL+LOX-1-siRNA组与ox-LDL组比较MMP-9蛋白表达明显减弱; p Genesil组MMP-9蛋白表达与对照组比较差异无统计学意义。结论 ox-LDL可促进小鼠巨噬细胞MMP9的表达;抑制小鼠巨噬细胞LOX-1的表达后,ox-LDL促进MMP9的表达相应减弱。由此可见ox-LDL可通过LOX-1受体促进MMP-9表达。

• 单位
  第二临床医学院; 山西医科大学