Mir-181a通过靶向c-fos基因抑制肺癌细胞迁移

作者：林述琨; 温吉海; 王耀鹏

来源：药品评价, 2012, (36): 28-30+34.

• 肺癌
• miR-181a
• 迁移
• A549细胞 Lung cancer
• miR-181a
• migration
• A549 cells

目的:利用双荧光蛋白报告基因分析系统验证miR-181a的直接靶基因c-fos,探讨miR-181a促进肺癌细胞迁移的可能机制。方法:Transwell小室检测miR-181a对肺癌细胞迁移的影响;应用生物信息学预测软件TargetScan对miR-181a靶基因进行预测,并通过双荧光素酶报告基因检测miR-181a对靶基因c-fos的3'UTR区的调控作用;通过Westernblot方法检测miR-181a对c-fos蛋白表达的影响;结果:A549细胞转染miR-181a后,细胞的迁移能力降低;生物信息学预测c-fos是miR-181a的靶基因,构建融合c-fos的3'UTR区表达质粒pMIR-c-fos,在此基础上对c-fos的3'UTR"种子区"进行定点突变。双荧光素酶报告基因分析表明miR-181a能够作用于c-fos的3'UTR。Western blot方法进一步证实c-fos是miR-181a的靶基因。结论:Mir-181a可能通过靶向c-fos基因,抑制肺癌细胞迁移。