缺氧条件下谷氨酸转运体和γ-氨基丁酸转运体在星形胶质细胞中的表达变化及作用

作者：王之涵; 邢进; 魏子龙; 沙龙贵; 周新军; 林盈盈; 邱永明; 任力^*

来源：中国临床神经外科杂志, 2018, 23(11): 735-738.

DOI：10.13798/j.issn.1009-153X.2018.11.012

• 脑缺血
• 缺氧
• 星形胶质细胞
• 细胞凋亡
• 谷氨酸转运蛋白1
• γ-氨基丁酸转运蛋白1
• 基因表达

目的探讨缺氧条件下谷氨酸转运体(GLT1)和γ-氨基丁酸转运体(GAT1)在星形胶质细胞中的表达变化及作用。方法星形胶质细胞在含有10%胎牛血清DMEM中培养,在培养液中加入100μmol/L氯化钴溶液处理16、24、48 h模拟缺氧环境。通过慢病毒介导的表达特异性的短发夹RNA(shRNA)沉默GLT1和GAT1基因表达,或者使GLT1和GAT1基因过表达。PCR检测GLT1和GAT1 mRNA表达水平,免疫印迹法检测GLT1和GAT1蛋白表达水平,流式细胞术检测细胞凋亡。结果加入氯化钴处理后,星形胶质细胞GLT1 mRNA和蛋白表达水平显著增高(P<0.05),而GAT1 mRNA和蛋白表达水平显著下降(P<0.05);两者均呈时间依赖性。沉默GLT1基因表达同时过表达GAT1,星形胶质细胞凋亡率明显增加(P<0.05);而过表达GLT1同时沉默GAT1基因表达,星形胶质细胞凋亡率明显减少(P<0.05)。结论缺氧条件下,体外培养的星形胶质细胞GLT1表达上调,而GAT1表达下调,促进星形胶质细胞凋亡。

• 单位
  上海市浦东医院; 复旦大学; 上海交通大学医学院附属仁济医院