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摘要
为建立针对常见高组胺鱼成分的实时荧光PCR(real-time PCR)检测方法，本研究以日本鲭的ATP-6基因、金枪鱼的BGH基因、秋刀鱼和沙丁鱼的Cytb基因为靶基因设计特异性的引物和探针，并通过反应体系的优化试验、特异性试验和灵敏性试验，建立了针对4种高组胺鱼成分的实时荧光PCR检测方法。结果显示，该方法特异性强，对其他常见鱼类物种均无特异性扩增，日本鲭、沙丁鱼、秋刀鱼和金枪鱼的灵敏性可分别达到10.0 pg/μL、1.0 pg/μL、1.0 pg/μL、1.0 pg/μL；以人工模拟样品进行检出限分析，建立的实时荧光PCR方法的检出限均可达0.1%；对市售的36份鱼肉制品进行检测，日本鲭、沙丁鱼、秋刀鱼和金枪鱼成分的检出率分别为11.11%(4/36)、5.56%(2/36)、5.56%(2/36)和16.67%(6/36)。本研究建立的针对4种常见高组胺鱼成分的实时荧光PCR检测方法，操作简便、结果可靠，可为我国鱼肉制品进出口检验监管和食品安全监管提供技术支撑。
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单位公共卫生学院; 河北医科大学
