核苷类似物对小鼠肝脏线粒体DNA D-loop区突变的影响

作者：张维; 乔录新; 丁渭; 陈德喜; 张玉林

来源：中国医药导报, 2016, 13(15): 9-12.

• D-loop区
• 线粒体DNA
• 肝细胞
• 核苷类似物

目的探讨长期使用核苷类似物(NA)是否导致肝脏线粒体DNA(mt DNA)D-loop区损伤。方法选取7周龄Balb/C小鼠25只,将其随机分为对照组和4个NA实验组。对照组腹腔内注射双蒸水,各实验组分别给予司他夫定(D4T)50 mg/kg、齐多夫定(AZT)100 mg/kg、拉米夫定(3TC)50 mg/kg和去羟肌苷(DDI)50 mg/kg,分别腹腔内注射,每周5次,共12周。取各组小鼠肝组织,通过激光捕获显微切割获取肝细胞,对mt DNA D-loop区克隆和测序。结果 DDI组肝组织中mt DNA拷贝数(0.440±0.040)和肝细胞中mt DNA拷贝数(0.464±0.013)均较对照组[(1.000±0.080)、(1.000±0.058)]显著减少,差异均有统计学意义(均P<0.05)。D4T组肝细胞D-loop区与参考序列的平均距离为(0.0037±0.0019),3TC组为(0.0031±0.0017),DDI组为(0.0035±0.0028),与对照组(0.0018±0.0017)比较差异均有统计学意义(均P<0.05)。D4T组肝细胞D-loop区平均同义替换率(d S)为(0.0060±0.0010),3TC组为(0.0050±0.0007),与对照组(0.0030±0.0007)比较差异有统计学意义(P<0.05)。DDI组肝细胞D-loop区平均错义替换率(d N)为(0.0020±0.0010),与对照组(0.0008±0.0003)比较差异有统计学意义(P<0.05)。AZT组肝组织D-loop区的"A→G"转换率(0.001 90)较对照组(0.000 62)高,差异有统计学意义(P<0.05)。D4T组肝细胞D-loop区的"T→C"转换率为0.001 28,3TC组为0.001 75,较对照组(0.000 58)显著增高,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论长期暴露于核苷类似物可导致小鼠肝细胞mt DNA D-loop区病变,主要突变类型为转换,主要的转换为"A→G"和"T→C"。

• 单位
  首都医科大学附属北京佑安医院; 北京市肝病研究所