细粒棘球绦虫表面抗原热休克蛋白抗体在免疫组化中的应用

作者：路鹏霏; 田梦潇; 齐**; 包永星^*; 毛睿^*

来源：中国人兽共患病学报, 2023, 39(05): 440-446.

• 细粒棘球绦虫
• EgHSP70
• 生物信息学
• 免疫组化

目的 用生物信息工具分析细粒棘球绦虫表面抗原热休克蛋白70(EgHSP70)的理化性质、结构域等信息，并制备多克隆抗体进行人、羊、小鼠肝包虫病的免疫组化研究。方法 EgHSP70氨基酸序列经NCBI数据库中下载，用ProtParam(性质)、SignalP-5(信号肽)、SOSUI(亚细胞定位)、ProtScale、SOSUI、DNASTAR(亲疏水性)、SOMPA(二级结构)、Swissmodel(三级结构)、TMHMM(跨膜区域)工具分析。制备多克隆蛋白抗体，分别进行人、绵羊、C57BL/6J小鼠肝包虫的免疫组化染色。结果 EgHSP70是由258个氨基酸序列组成，分子式为C1248H2024N354O392S2,不稳定指数为42.00,为亲水蛋白，无信号肽，无跨膜区，且定位于细胞质中。二级结构中，α螺旋占47.29%,β折叠占16.28%,β转角占8.53%,无规则卷曲占27.91%。免疫组化结果显示，EgHSP70多克隆抗体能够在细粒棘球绦虫的生发层(包囊)细胞中高表达，在羊、C57小鼠正常肝组织中少量表达，在人肝脏组织中不表达。结论 免疫组化检测EgHSP70的多克隆抗体在不同的物种组织中，能识别生发层细胞及细粒棘球蚴虫体细胞。

• 单位
  新疆医科大学第一附属医院; 新疆医科大学; 基础医学院