交感神经递质通过促进肺动脉平滑肌细胞增殖参与野百合碱诱导肺动脉高压模型大鼠的肺血管重塑

作者：吴水碧; 董文鹏^*; 周静; 林敏; 葛圣林

来源：中华实验外科杂志, 2023, 40(05).

• 肺动脉高压
• 交感神经
• 去甲肾上腺素
• 神经肽Y
• 肺动脉平滑肌细胞

目的探讨野百合碱诱导的大鼠肺动脉高压(PAH)模型中肺中小血管周围去甲肾上腺素(NE)和神经肽Y(NPY)的水平及其在肺血管重塑的作用。方法将20只6～8周龄的Sprague Dawley(SD)大鼠(安徽医科大学实验动物中心提供)采用抽签法随机分为对照组(Control组) 9只和野百合碱诱导肺动脉高压组(MCT-PAH组)11只。通过腹腔注射野百合碱(MCT, 50 mg/kg)构建PAH模型。通过血流动力学参数、苏木精-伊红(HE)染色评价PAH模型。酶联免疫吸附试验(ELISA)、免疫荧光及蛋白质印迹法评价NE和NPY表达。提取大鼠肺动脉组织做原代肺动脉平滑肌细胞(PASMCs)培养, 通过细胞计数试剂盒(CCK-8)、流式细胞术检测PASMCs的增殖能力, 两组之间比较采用t检验。结果与Control组比较, HE染色显示MCT-PAH组大鼠右心室心肌排列紊乱, 间隙增宽, 周围可见胶原纤维沉积, 远端肺小动脉呈向心性肥厚, 管壁增厚, 管腔明显变窄;血浆NE[(100.32±8.95) nmol/L比(124.69±20.66) nmol/L, t=-2.892, P<0.05]和NPY水平[(914.15±181.51) ng/L (1 115.86±138.91) ng/L, t=-2.388, P<0.05]、肺组织酪氨酸羟化酶(TH, 0.366±0.01比0.865±0.111, t=-7.713, P<0.01)和NPY表达(0.798±0.080比1.044±0.126, t=-2.860, P<0.05)以及PASMCs周围的TH(25.75±1.11比34.45±6.07, t=-3.167, P< 0.05)和NPY的平均荧光强度(40.10±3.20比49.47±2.28, t=-5.677, P< 0.01)以及TH(1.86±2.13比18.96±4.81, t=-7.886, P< 0.01)和NPY相对荧光强度均增加(5.92±1.59比58.93±13.93, t=-8.474, P< 0.01)。体外实验结果显示与对照组比较, NE组[(100.00±6.74)%比(112.90±2.01)%, t=3.178, P<0.05]和NPY组[(100.00±14.17)%比(164.20±7.88)%, t=6.856, P<0.01]在浓度为100 nmol/L时PASMCs的细胞活力最高, CFSE标记的PASMCs增殖指数(NE组:2.678±0.867比2.783±0.898, t=-4.657, P<0.05;NPY组:2.878±1.044比3.095±1.098, t=-4.035, P<0.05)和分裂指数(NE组:2.435±1.084比2.553±1.083, t=-5.953, P<0.01;NPY组:2.608±0.978比2.960±1.166, t=-2.470, P<0.01)均明显高于对照组。结论 MCT-PAH大鼠全身和局部肺交感神经均过度激活, 循环、肺组织和肺小动脉平滑肌细胞周围NE和NPY的增加通过促进PASMCs增殖参与PAH肺血管的重塑过程。

• 单位
  成都市第三人民医院; 安徽医科大学第一附属医院