利用Gateway技术构建重组腺病毒pAd-NK4

作者：阙文忠; 陈君敏

来源：中国药理学通报, 2011, (04): 462-467.

• 腺病毒
• Gateway技术
• 人肝细胞生长因子
• NK4
• 基因治疗
• 肿瘤 adenovirus
• Gateway technology
• hepatocyte growth factor
• NK4
• gene therapy
• tumor

目的利用Gateway技术构建含人肝细胞生长因子(HGF)NK4基因的重组腺病毒载体。方法以含有HGF/NK4基因的质粒为模板PCR扩增NK4基因,将回收的NK4PCR产物片段克隆至腺病毒穿梭载体pYr-adshuttle-6获得重组质粒pYr-adshuttle-6-NK4。从该重组质粒上,利用LR同源重组将NK4-IRES-EGPF表达框转移至腺病毒骨架质粒pAD/BL-DEST,获得重组腺病毒质粒pAd-NK4-IRES-EGFP。该质粒经pacI线性化后转染293包装细胞,获得重组腺病毒rAd-NK4-IRES-EGFP。采用TCID 50(tissue cell infectious...

• 单位
  福建医科大学附属第一医院