ARLTS1基因重组质粒对卵巢癌细胞株SKOV3生长和凋亡的影响

作者:杨小芸; 余海; 林卫; 彭芝兰
来源:四川大学学报(医学版), 2009, 40(01): 6-10.
DOI:10.3969/j.issn.1672-173X.2009.01.002

摘要

目的探讨Ras超家族成员ARLTS1基因对卵巢癌细胞株SKOV3生长及凋亡的影响。方法构建真核表达质粒pCMV-Tag3B-ARLTS1,并转染卵巢癌SKOV3细胞株,采用RT-PCR技术和Western blot方法检测ARLTS1基因转染组、空载体pCMV-Tag3B转染组和未转染组中ARLTS1 mRNA及蛋白表达水平,用MTT及流式细胞仪检测各组细胞生长、周期及凋亡率等生物学行为的变化,Western blot检测细胞caspase-3和bcl-2蛋白表达水平的变化。结果真核表达质粒pCMV-Tag3B-ARLTS1转染SKOV3细胞后,经PCR和Western blot证实转染成功。ARLTS1转染SKOV3细胞后,细胞生长明显受抑(P<0.05)。流式细胞术检测发现ARLTS1基因转染组与空载体转染组及未转染组细胞相比,S期细胞比例明显增多(P=0.035和0.011),细胞凋亡率(36.7%)显著高于另两组细胞(P均<0.001)。ARLTS1基因转染组细胞中caspase-3和bcl-2蛋白表达水平分别下降34.9%和47.7%,与未转染组细胞相比差异有统计学意义(P<0.05)。结论ARLTS1基因转染后能抑制人卵巢癌细胞SKOV3的生长,调控SKOV3细胞周期,可能通过caspase途径促进肿瘤细胞凋亡。

  • 单位
    四川大学华西医院; 四川大学华西第二医院

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