环磷酰胺诱导的尼罗罗非鱼体内外肝损伤模型的构建

作者:曹丽萍; 杜金梁; 贾睿; 丁炜东; Galina Jeney; 徐跑; 殷国俊*
来源:安徽农业大学学报, 2022, 49(01): 76-80.
DOI:10.13610/j.cnki.1672-352x.20220325.010

摘要

以环磷酰胺(CTX)为诱导物,建立罗非鱼体内外急性肝损伤模型。体外,0、5、10、15、20和25 mmol·L-1CTX分别作用于离体培养的罗非鱼精密肝切片(PCLS)6 h后,测定切片培养上清中谷丙转氨酶(GPT)、谷草转氨酶(GOT)和乳酸脱氢酶(LDH)水平,同时收集肝切片,用噻唑蓝(MTT)法检测肝切片增殖活性,测定切片内总抗氧化能力(T-AOC)、丙二醛(MDA)、过氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽(GSH)水平。体内,采用胸腔注射法造模,每千克鱼体重分别注射0、10、25、75和100 mg环磷酰胺(下文以mg·kg-1表示),每隔3 d给药1次,连续3次。末次给药后第4天取血,测定罗非鱼血清中GPT、GOT和LDH及肝组织匀浆中T-AOC、MDA、SOD和GSH水平。结果显示:20~25 mmol·L-1 CTX作用体外培养精密肝切片6 h及75~100 mg·kg-1 CTX胸腔注射罗非鱼后,均可以导致GPT、GOT和LDH活力显著升高;T-AOC、SOD活力及GSH含量显著下降,MDA含量显著提高。同时,20和25 mmol·L-1 CTX能导致肝切片增殖活性显著下降,分别为空白对照组的67.29%和55.41%,且有剂量依赖性。结果表明:CTX可引起罗非鱼肝损伤;分别采用20 mmol·L-1 CTX作用体外培养PCLS 6 h或者采用75~100 mg·kg-1 CTX胸腔注射罗非鱼,每隔3 d给药1次,连续3次,均可以构建体内外急性肝损伤模型。

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