来源于生孢噬纤维菌的新型β-葡萄糖苷酶SmBgl3A的性质研究

作者：费嵩禹; 王梓懿; 荆晓凤; 杨帆; 陈晓艺^*; 李宪臻

来源：食品与生物技术学报, 2023, 42(01): 83-92.

• 葡萄糖苷酶
• GH3家族
• 生孢噬纤维菌CX11
• 异源表达
• 酶学性质

通过表达水平分析比较，从生孢噬纤维菌Sporocytophaga sp.CX11基因组中筛选出在菌株降解纤维二糖过程中起关键作用的β-葡萄糖苷酶基因Sm Bgl3A。该基因含有2 283 bp碱基对，编码760个氨基酸，其编码蛋白质与来源于Bacteroides ovatus的β-葡萄糖苷酶Bo GH3B同源性为46.76%。将该基因在大肠杆菌中进行异源表达，粗酶液经Ni-NTA亲和层析一步纯化得到电泳级纯度的酶蛋白Sm Bgl3A，重组蛋白质相对分子质量与理论值(8.12×104)一致。酶学性质表征结果表明，Sm Bgl3A最适温度和p H分别为35℃和6.5;p H在5.0～7.0、温度在40℃以下时，稳定性较好，同时有着较好的Na Cl耐受性。Sm Bgl3A的最适底物为p NPG，以p NPG为底物时的比活力高达14.74 U/mg;Km值为10.88 mmol/L,kcat值为46.72 s-1。Sm Bgl3A作为一种新型的、酶学性质优良的β-葡萄糖苷酶，进一步扩展了β-葡萄糖苷酶的种类，为该酶在纤维素降解、食品工业等领域的应用奠定基础。

• 单位
  生物工程学院; 大连工业大学