低浓度百草枯诱导小鼠小胶质细胞异常活化的M1/M2表型变化

作者：李颖颖; 武坷鑫; 田甜; 王一帆; 闫伟广; 黄敏^*

来源：中华劳动卫生职业病杂志, 2019, (12).

• 百草枯
• 小鼠
• 小胶质细胞
• 活化
• 表型
• 炎症

目的 观察低浓度百草枯(PQ)对小鼠小胶质细胞(BV2)的激活情况,探讨PQ对BV2细胞M1/M2表型变化的影响。方法 以BV2细胞为模型,用终浓度0、0.015、0.03、0.06、0.12、0.24、0.48 μmol/L PQ及0.05 μmol/L 1-甲基-4-苯基吡啶离子(MPP+)处理细胞24 h,CCK8法测定细胞存活率；用终浓度0、0.015、0.03、0.06、0.12 μmol/L PQ及0.05 μmol/L MPP+处理细胞24 h,酶联免疫吸附(ELISA)法测定细胞培养上清液中肿瘤坏死因-α(TNF-α)、白细胞介素(IL)-6、IL-1β含量,Transwell小室法测定细胞迁移能力,免疫荧光法和流式细胞仪测定细胞吞噬能力；用终浓度0、0.03、0.06、0.12 μmol/L PQ及0.05 μmol/L MPP+处理细胞24 h,蛋白免疫印迹(Western blot)法测定M1型BV2细胞标志物TNF-α、IL-6、IL-1β、一氧化氮合酶(iNOS)、CD86及M2型BV2细胞标志物Ⅰ型精氨酸酶(Arg-1)、甘露糖受体(CD206)的蛋白表达水平。结果 与0 μmol/L PQ组比较,0.03～0.12 μmol/L PQ组BV2细胞增殖活性均明显升高,0.48 μmol/L PQ组增殖活性明显抑制,差异均有统计学意义(P<0.05)；0.03 μmol/L PQ处理24 h的BV2细胞增殖活性明显升高(P<0.05)；ELISA结果显示,与0 μmol/L PQ组比较,0.03、0.06 μmol/L PQ组BV2细胞上清液中TNF-α、IL-6、IL-1β含量明显升高(P<0.05)；免疫荧光和流式细胞仪测定结果显示,与0 μmol/L PQ组比较,0.015、0.03、0.06 μmol/L PQ组细胞吞噬能力明显增强(P<0.05)；Transwell结果显示,0.03、0.06、0.12 μmol/L PQ组细胞侵袭能力较0 μmol/L PQ组明显升高(P<0.05)；Western blot结果显示,与0 μmol/L PQ组比较,0.03、0.06 μmol/L PQ组的M1型标志物TNF-α、IL-6、IL-1β、iNOS和CD86蛋白表达水平明显升高,0.06、0.12 μmol/L PQ组M2型标志物Arg-1、CD206蛋白表达水平明显降低(P<0.05)。结论 低浓度PQ可以异常激活BV2细胞,使得BV2细胞向促炎型M1型转化而抑制其向抗炎型M2型转化。

• 单位
  宁夏医科大学