摘要
目的:探讨苦参碱对肿瘤坏死因子-α(TNF-α)诱导胶原诱导性关节炎(CIA)大鼠成纤维样滑膜细胞(FLS)中磷脂酰肌醇-3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(PKB/AKT)信号传导通路相关蛋白及基因表达的影响。方法:按照随机数字表法将40只SD大鼠分为正常对照组、炎症细胞组、苦参碱组、抑制剂组,每组10只。除正常对照组外,其余各组通过牛Ⅱ型胶原与不完全弗氏佐剂建立CIA大鼠模型。断椎法处死大鼠,剥离大鼠滑膜组织,提取FLS,并进行细胞培养、鉴定。正常对照组不加任何药物干预,炎症细胞组仅予TNF-α干预,苦参碱组予TNF-α及苦参碱干预,抑制剂组予TNF-α及LY294002干预。Western Blot测定各组CIA大鼠FLS中p-PI3K、p-AKT、AKT蛋白的表达程度,RT-PCR测定PI3K mRNA、AKT mRNA的表达程度。结果:与正常对照组比较,其余各组CIA大鼠FLS数量明显增多;免疫荧光测定显示绝大多数细胞染色呈阳性表达。与炎症细胞组比较,苦参碱组、抑制剂组p-PI3K、p-AKT蛋白表达程度下降(P < 0.01或P < 0.05),PI3K mRNA、AKT mRNA表达程度受到明显抑制(P < 0.01);各组间非活化AKT蛋白表达差异无统计学意义(P > 0.05)。结论:苦参碱对CIA大鼠FLS中PI3K/AKT信号传导通路的过度活化具有抑制作用。
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