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摘要
目的 建立布鲁氏菌外膜蛋白OMP10间接ELISA检测方法，评价OMP10在小鼠体内的免疫效果。方法 本研究表达和纯化了布鲁氏菌外膜蛋白OMP10,通过Western Blot进行验证，建立了OMP10间接ELISA检测方法，然后将OMP10与弗氏佐剂和LDH佐剂配伍成2种亚单位疫苗，免疫小鼠后检测抗体水平、脾脏淋巴细胞的增殖水平、CD4+和CD8+T细胞比值以及细胞因子分泌，最后通过攻毒试验评估OMP10的免疫保护效果。结果 OMP10作为诊断抗原的特异性和符合率均高于70%;免疫小鼠后2种亚单位疫苗均能产生高滴度的IgG抗体，CD4+/CD8+T的比值均高于PBS对照组，IFN-γ高于PBS对照组，差异具有统计学意义(P<0.01),但IL-4未发生明显变化，表明OMP10能够诱导很好的体液免疫及Th1型免疫应答。免疫保护结果显示，2种亚单位疫苗免疫组小鼠脾脏指数和脾脏载菌量低于布鲁氏菌M5感染组，差异具有统计学意义(P<0.01),表明OMP10蛋白配伍的亚单位疫苗对布鲁氏菌M5感染小鼠具有高度的保护作用。结论 外膜蛋白OMP10在布鲁氏菌诊断和疫苗方面具有一定的应用价值。
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