摘要
目的考察麻杏石甘汤(MXSGT)含药肝孵育液较优的制备工艺条件,并通过液质联用分析探讨其疗喘主要差异性成分,为该方法用于体外药理学研究提供支撑。方法选用L9(34)正交表,将肝细胞密度(A)、肝细胞悬液-含药肠吸收液体积比(B)、孵育时间(C)作为3因素,各取3水平,采用HPLC检测MXSGT含药肝孵育液9个实验组中麻黄碱、伪麻黄碱、苦杏仁苷、甘草酸铵的含量,得出较优制备条件。应用三重四级杆液质联用仪(TSQ-Quantis)技术,采用Waters ACQUITY UPLC BEH C18色谱柱(2.1 mm×100 mm, 1.7μm),柱温40℃,流动相0.05%甲酸水-乙腈梯度洗脱,电喷雾离子源,正离子模式(ESI+)和负离子模式(ESI-)扫描,采集MXSGT含药肝孵育液质谱图数据,PLS分析找出其疗喘主要差异性成分。结果当BRL-3A细胞密度为1×105个/mL、细胞悬液:含药肠吸收液=1:12、孵育时间为10 min时,4种成分含量均最高,可选为含药肝孵育液的制备工艺条件。MXSGT含药肝孵育液中主要差异性疗喘化合物为甲基麻黄碱、麻黄碱、伪麻黄碱、苦杏仁苷、甘草苷、甘草素、甘草酸铵7种。结论建立的含药肝孵育液制备工艺简便准确、重复性好、专属性强,可为后续的体外药理作用及机制研究提供新的方法;基本明确了MXSGT口服后通过肠吸收由门静脉经肝入血的物质基础,可为深入地成分-靶点分析乃至复方配伍规律研究提供依据。
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单位江西中医药大学药学院