右美托咪定对心肌缺血再灌注损伤大鼠的作用及机制研究

作者：李晓滨; 白建云; 赵启兵^*

来源：陕西医学杂志, 2022, 51(09): 1060-1065.

• 心肌缺血再灌注损伤
• 右美托咪定
• 丝裂原活化蛋白激酶
• 氧化应激
• 内质网应激
• 大鼠

目的:探讨右美托咪定(Dex)对心肌缺血再灌注损伤(MIRI)大鼠的作用，并分析其机制。方法:将36只雄性SD大鼠随机分为对照组、MIRI模型组(MIRI组)和Dex治疗组(MIRI+Dex组),每组12只。MIRI组和MIRI+Dex组的24只大鼠用于建立MIRI模型。为研究miR-146a在Dex对MIRI大鼠心肌细胞作用中的机制，将心肌细胞分为NC组(对照组大鼠心肌细胞)、抑制剂组(对照组大鼠心肌细胞转染miR-146a抑制剂)、MIRI+NC组(MIRI组大鼠心肌细胞)、MIRI+抑制剂组(MIRI组大鼠心肌细胞转染miR-146a抑制剂)、Dex+MIRI+NC组(MIRI+Dex组大鼠心肌细胞)和Dex+MIRI+抑制剂组(MIRI+Dex组大鼠心肌细胞转染miR-146a抑制剂)。为进一步验证丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路是否参与了Dex对MIRI心肌细胞的作用机制，将心肌细胞分为对照组(仅用培养基处理大鼠心肌细胞)、SB组[p38 MAPK信号通路抑制剂SB203580 (SB) 0.5μmol/L预处理2 h]、MIRI组(MIRI组大鼠心肌细胞)、MIRI+SB组(MIRI组大鼠心肌细胞用0.5μmol/L SB预处理2 h)、Dex+MIRI组(MIRI+Dex组大鼠心肌细胞)和Dex+MIRI+SB组(MIRI+Dex组大鼠心肌细胞用0.5μmol/L SB预处理2 h)。使用相应检测试剂盒测定乳酸脱氢酶(LDH)活性、超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)水平。采用流式细胞术检测细胞凋亡率和活性氧(ROS)水平。使用定量实时PCR(qPCR)检测葡萄糖调节蛋白78(GRP78)、下游靶基因C/EBP家族同源蛋白(CHOP)、锰超氧化物歧化酶(MnSOD)、醌氧化还原酶1(NQO1)、过氧化氢酶(CAT)和miR-146a的mRNA相对表达量。结果:MIRI组miR-146a水平、SOD活性和细胞活力低于对照组，LDH活性、MDA水平、GRP78和CHOP水平、细胞凋亡率高于对照组(均P<0.05)。MIRI+Dex组miR-146a表达水平、SOD活性和细胞活力高于MIRI组，LDH活性、MDA水平、GRP78和CHOP水平、细胞凋亡率低于MIRI组(均P<0.05)。抑制剂组和MIRI+NC组细胞活力和miR-146a mRNA相对表达量明显低于NC组，Dex+MIRI+NC组细胞活力和miR-146a mRNA相对表达量高于Dex+MIRI+抑制剂组，而ROS水平表现出相反趋势(均P<0.05)。抑制剂组和MIRI+NC组GRP78、CHOP mRNA相对表达量高于NC组，MIRI+NC组低于MIRI+抑制剂组而高于Dex+MIRI+NC组，且Dex+MIRI+抑制剂组高于Dex+MIRI+NC组，而CAT、MnSOD、NQO1 mRNA相对表达量显示出相反趋势(均P<0.05)。MIRI组细胞活力低于对照组，但在MIRI+SB组和Dex+MIRI组中升高(均P<0.05)。MIRI组GRP78、CHOP mRNA相对表达量高于对照组，MIRI+SB和Dex+MIRI组则低于MIRI组(均P<0.05)。但Dex+MIRI+SB组GRP78 mRNA相对表达量低于Dex+MIRI组，CHOP mRNA相对表达量高于Dex+MIRI组(均P<0.05)。经SB预处理2 h后发现，抑制剂组细胞活力低于NC组，而抑制剂+SB组细胞活力高于抑制剂组(均P<0.05);抑制剂组GRP78、CHOP mRNA相对表达量高于NC组和抑制剂+SB组(均P<0.05);抑制剂+SB组GRP78、CHOP mRNA相对表达量低于抑制剂(均P<0.05)。结论:Dex可能通过调节miR-146a的表达，进一步调节内质网应激(ERS)和氧化应激，最终通过MAPK信号通路影响MIRI心肌细胞的细胞活力和凋亡。

• 单位
  宝鸡市中医医院; 安康市人民医院