Dectin-1融合蛋白真核表达载体的构建及鉴定

作者：孙雯雯; 刘丁; 张莉萍

来源：中华医院感染学杂志, 2010, (05): 618-620.

• 真菌
• 融合蛋白
• Dectin-1基因
• 真核表达 Fungi
• Fusion protein
• Dectin-1
• Eukaryotic expression

目的构建小鼠Dectin-1融合蛋白真核表达质粒并进行真核表达初步研究。方法运用RT-PCR技术扩增小鼠腹腔巨噬细胞Dectin-1基因的细胞外碳水化合物识别域(CRD),与真核表达载体pSecTag2C进行双酶切之后进行连接反应,构建重组融合表达载体,转染入293细胞中,目的蛋白在细胞培养基中分泌表达,表达产物经蛋白浓缩、纯化后经SDS-PAGE、Western印迹鉴定。结果获得重组真核表达载体pSecTag2C-Dectin-1,测序结果证明质粒DNA序列完全正确,并在转染入293细胞后检测到目的蛋白的表达。结论成功构建重组真核表达载体pSecTag2C-Dectin-1,为进一步纯化蛋白...

• 单位
  重庆医科大学附属第一医院; 第三军医大学大坪医院