小分子干扰RNA抑制黏着斑激酶基因对子宫内膜癌细胞生物学特征的影响

作者：贾冬丽; 方丽丽; 司晓辉; 王远菊

来源：安徽医药, 2019, 23(01): 79-216.

• 子宫内膜肿瘤
• 黏着斑激酶1
• 黏着斑激酶2
• RNA,小分子干扰
• 流式细胞术
• 印迹法,蛋白质
• 细胞运动
• 肿瘤侵润

目的探讨小分子干扰RNA(small interference RNA,si RNA)抑制黏着斑激酶(focal adhesion kinase,FAK)基因对子宫内膜癌细胞生物学特征的影响。方法培养人子宫内膜癌HEC-1A细胞,分为si RNA-FAK组、si RNA-阴性对照组和空白对照组,实时荧光定量PCR检测各组细胞中FAK基因表达,细胞增殖能力、迁移和侵袭能力检测分别采用MTT法和Transwell法,蛋白质印迹法(Western blot)检测各组细胞中FAK、磷酸肌醇3激酶(phosphoinositol 3 kinase,PI3K)、磷酸化-Akt(phosphorylateAkt,p-Akt)、磷酸化-哺乳动物雷帕霉素(phosphorylation-mammalian rapamycin,p-mTOR)蛋白表达。结果 si RNA-FAK组细胞中FAK m RNA和蛋白相对表达量分别为(1. 31±0. 15)、(0. 26±0. 08),均低于si RNA-阴性对照组[(2. 06±0. 18)、(0. 62±0. 11)]和空白对照组[(2. 11±0. 20)、(0. 64±0. 13)],差异有统计学意义(P <0. 05); si RNA-FAK组24 h、48 h、72 h、96 h时细胞吸光度A值均低于si RNA-阴性对照组和空白对照组,均差异有统计学意义(P <0. 05);与si RNA-阴性对照组和空白对照组比较,si RNA-FAK组迁移细胞数和侵袭细胞数均降低,si RNA-FAK组细胞中FAK、PI3K、p-Akt、p-mTOR蛋白表达相对表达量均降低,而Akt和m TOR蛋白相对表达量均升高,均差异有统计学意义(P <0. 05)。结论沉默FAK基因表达可抑制HEC-1A细胞增殖、迁移及侵袭能力,可能与抑制PI3K/Akt/m TOR信号有关。

• 单位
  漯河市中心医院