人p27~(kip1)基因腺相关病毒载体的构建

作者：黄宇; 林建华

来源：中国骨与关节损伤杂志, 2009, 24(02): 126-128.

• p27~(kip1)基因
• 腺相关病毒载体
• 基因重组 p27~(kip1)
• AAV
• Gene recombination

目的克隆人肿瘤转移抑制基因p27kip1,利用基因重组技术,构建其腺相关病毒载体,为进一步研究骨肉瘤的基因治疗建立一个平台。方法从人正常胎盘组织中提取总RNA,RT-PCR获取p27kip1基因(ORF)cDNA序列,并将其克隆至腺相关病毒载体pAAV-MCS,构建人p27kip1基因腺相关病毒载体。结果人胎盘组织抽提总RNA,并通过RT-PCR获得目的基因ORF,经TA克隆后,将目的基因连入pAAV-MCS中,送测序结果无误。结论成功构建的重组质粒pAAV-MCS-p27kip1,将为进一步研究p27kip1蛋白的生物学效应提供基础,为p27kip1基因应用于骨肉瘤的治疗提供实验依据。

• 单位
  福建医科大学附属第一医院