埃博拉病毒NP抗原表位区段的克隆和表达

作者：王晓丹; 李鹏飞; 冯晓燕; 朱翠侠; 阙海萍; 张旭辉; 刘志强; 段翠密; 修冰水; 张贺秋

来源：军事医学, 2014, 38(09): 659-662.

• 埃博拉病毒
• 核蛋白
• 抗原表位区段
• 表达

目的分析埃博拉病毒核蛋白(NP)抗原表位,克隆表达埃博拉病毒NP抗原,为免疫学诊断试剂的研究奠定基础。方法采用BioSun生物学软件预测分析埃博拉病毒NP抗原的氨基酸表位区间,采用大肠杆菌优势密码子反向翻译成基因序列,采用PCR退火合成法合成NP优势密码子抗原基因,并利用载体pBVIL1进行克隆表达。采用间接ELISA技术评价获得NP抗原的特异性。结果确定埃博拉病毒NP抗原的氨基酸表位位于360739 aa,共设计36条引物,扩增合成1140 bp的NP抗原基因,克隆表达后,融合蛋白相对分子质量为58×103,测序结果显示插入的NP基因正确。初步结果显示,NP抗原的特异性为99.24%(130/131)。结论获得埃博拉病毒NP抗原,为进一步研制特异的埃博拉病毒快速诊断试剂提供了抗原储备。

• 单位
  军事医学科学院基础医学研究所