青蒿琥酯与重组蛋白IL-33联合调控小鼠脑型疟免疫相关指标研究

作者：杜云婷^*; 赵薇; 曹雅明; 徐兰

来源：中国寄生虫学与寄生虫病杂志, 2020, 38(02): 139-145.

• 伯氏疟原虫ANKA
• 白细胞介素-33
• 青蒿琥酯
• 脑型疟

目的探讨青蒿琥酯(ART)和重组白细胞介素-33(r IL-33)联合治疗伯氏疟原虫ANKA(PbA感染小鼠脑型疟的效果及其对免疫相关指标的影响。方法 40只雌性C57BL/6小鼠随机分为5组:PbA感染未治疗组(Pb A组),PbA感染治疗组(Pb A+rIL-33组、 PbA+ART组、 PbA+rIL-33+ART组)和健康对照组,每组8只。PbA组及各治疗组小鼠经腹膜内注射1×106个Pb A感染的红细胞;感染后第2～4天,PbA+rIL-33组小鼠经腹膜内注射r IL-33(0.2μg/鼠,连续3 d), PbA+ART组灌胃ART [40 mg/(kg·d),连续3 d], PbA+rIL-33+ART组灌胃ART [40 mg/(kg·d)]并经腹膜内注射rIL-33(0.2μg/鼠,连续3 d); Pb A组不作处理;健康对照组在相同时间点注射等体积的PBS。感染后第3天起每隔1天采尾静脉血制作血涂片,吉氏染色后计数感染红细胞并计算感染率,记录小鼠死亡情况和生存期。感染后第5天各组取1只小鼠,尾静脉注射伊文思蓝溶液,根据脑组织上清液的吸光度(A630值)检测通过血脑屏障的伊文思蓝含量,评估血脑屏障完整性。感染后第5天每组各处死4只小鼠,取脾组织,流式细胞术检测脾细胞中的Th1/Th2、调节性T细胞(Treg)、巨噬细胞和Toll样受体4(TLR4)细胞的百分率和绝对数。结果 PbA组小鼠在感染后第6天出现神经症状,死亡发生在感染后第6天至第13天;PbA+rIL-33组和PbA+ART组死亡均发生于感染后第8天;PbA+rIL-33+ART组小鼠神经系统的症状发生明显被抑制,在感染后第12天开始死亡,第23天2/7的小鼠死于贫血。感染后第3～13天,PbA+rIL-33+ART组的红细胞感染率从0.30%升至19.67%,均低于PbA组(0.93%～20.00%)和PbA+rIL-33组(0.46%～19.67%)(P <0.05)。血脑屏障完整性检测结果显示,PbA+rIL-33+ART组小鼠脑组织上清液的A630值为(0.11±0.01),低于PbA组(0.44±0.01)(P <0.01)、 PbA+rIL-33组(0.19±0.01)(P <0.05)和PbA+ART组(0.27±0.02)(P <0.01)。流式细胞术分析结果显示,PbA+rIL-33+ART组脾细胞中Th1细胞百分率为(7.51±0.26)%,低于PbA组[(14.27±0.91)%](P <0.01),但与PbA+ART组[(9.56±1.75)%]、 PbA+rIL-33组[(8.67±0.26)%]的差异无统计学意义(P> 0.05); PbA+rIL-33+ART组Th2细胞百分率为(2.63±0.27)%,高于PbA组[(0.80±0.13)%](P <0.01)和PbA+ART组[(0.88±0.12)%](P <0.01),但与PbA+rIL-33组[(1.70±0.54)%]的差异无统计学意义(P> 0.05); PbA+rIL-33+ART组巨噬细胞百分率为(3.85±0.32)%,高于PbA组[(2.89±0.89)%](P <0.05),但与Pb A+ART组[(3.15±0.46)%]和PbA+r IL-33组[(4.11±0.68)%]的差异无统计学意义(P> 0.05); PbA+rIL-33+ART组Treg细胞百分率为(11.05±1.50)%,高于Pb A组[(6.44±0.09)%](P <0.05)和PbA+ART组[(6.27±0.39)%](P <0.01),但与PbA+rIL-33组[(9.34±0.61)%]的差异无统计学意义(P> 0.05); PbA+rIL-33+ART组TLR4细胞百分率为(1.43±0.21)%,高于Pb A组[(3.76±0.41)%](P <0.01),但与PbA+ART组[(1.69±0.26)%]和PbA+rIL-33组[(1.61±0.15)%]的差异无统计学意义(P> 0.05)。结论 rIL-33联合ART治疗可保护鼠疟模型的脑组织,通过平衡Th1/Th2免疫应答进而改善ART治疗脑型疟的结局及免疫效应。

• 单位
  河北工程大学附属医院; 辽宁省肿瘤医院; 中国医科大学; 基础医学院