乳铁蛋白通过调节Keap1-Nrf2信号通路改善Aβ25-35诱导的N2a细胞氧化应激和凋亡

作者：汪晓语; 吕嘉琦; 赵儒花; 单树方; 成果^*; 张伶俐; **

来源：现代预防医学, 2023, 50(06): 1098-1104.

DOI：10.20043/j.cnki.MPM.202208009

• 阿尔茨海默病
• 氧化应激
• 乳铁蛋白
• β淀粉样蛋白

目的 探索外源性乳铁蛋白(lactoferrin, Lf)对淀粉样蛋白25-35(β amyloid 25-35,Aβ25-35)诱导的阿尔茨海默病(Alzheimer’s Disease, AD)细胞模型的相关作用及机制。方法 将N2a细胞随机分为空白对照组，Lf组，Aβ组和Aβ+Lf组，应用CCK-8法检测细胞活力；Western Blot检测细胞Tau、p-Tau、Bax、Bcl-2、Caspase3、Cleaved-Caspase3、Nrf2、Keap1、HO-1等蛋白表达水平；Annexin FITC/PI双染法检测细胞凋亡比率；试剂盒检测细胞超氧化物歧化酶(superoxide dismutase, SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase, GSH-Px)和过氧化氢酶(catalase, CAT)活性以及氧化产物活性氧(reactive oxygen species, ROS)荧光强度、乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase, LDH)释放量、丙二醛(malondialdehyde, MDA)含量。采用t检验和方差分析进行组间比较。结果 (1)当Aβ25-35干预浓度为20μmol/L,干预时间为24 h时，细胞活力降至80%,且Tau蛋白磷酸化水平较空白组显著增加，表明AD细胞模型构建成功；(2)与Aβ组相比，Aβ+Lf组Bcl-2表达量显著增加(t=-10.573,P<0.001),Bax(t=40.529,P<0.001)和Cleaved-Caspase3/Caspase3(t=15.376,P<0.001)表达量显著降低，差异有统计学意义；(3)与Aβ组相比，Aβ+Lf组ROS荧光强度显著减弱，MDA含量(t=10.175,P<0.001)和LDH释放量(t=7.453,P<0.001)显著降低；(4)与Aβ组相比，预先干预Lf后，Keap1表达量显著降低(t=15.766,P<0.001),Nrf2(t=-32.475,P<0.001)和HO-1表达量(t=-6.792,P<0.001)显著升高。结论 Lf可通过调节Keap1-Nrf2/HO-1信号通路改善Aβ25-35诱导的N2a细胞氧化应激和凋亡。

• 单位
  四川大学华西第二医院