摘要
目的 探讨微纤丝相关蛋白5(MFAP5)在胰腺癌中的表达以及其对胰腺癌细胞的生物学影响及作用机制。方法 收集2019年9月至2021年9月皖南医学院第一附属医院收治的胰腺癌患者73例,qRT-PCR检测MFAP5在胰腺癌组织中的表达。免疫组化检测MFAP5在20对胰腺癌组织中的表达水平。ELISA检测胰腺癌患者及健康对照血清中MFAP5含量。利用获得的胰腺癌、癌旁新鲜组织,分离和培养肿瘤相关成纤维细胞(CAFs)和正常成纤维细胞(NFs)。构建MFAP5 siRNA沉默质粒进行CAFs转染。transwell和CCK8检测胰腺癌细胞侵袭和增殖能力的改变。使用重组MFAP5蛋白处理胰腺癌细胞,免疫印迹法检测癌细胞p-AKT与t-AKT的表达。结果 免疫组化结果显示,与癌旁组织相比,胰腺癌组织中MFAP5的表达水平升高(P<0.001),且MFAP5在胰腺癌间质中的表达水平较胰腺癌细胞高(P<0.001);采用ELISA法分析MFAP5在血清中的含量,与健康志愿者相比,胰腺癌患者血清中MFAP5的含量升高(P<0.01);qRT-PCR和Western blotting检测结果显示,胰腺癌组织样本中分离的CAFs中MFAP5的表达水平与NFs以及胰腺癌细胞中MFAP5的表达水平比较,MFAP5在CAFs中的表达水平高于其他细胞(P<0.05)。结论 MFAP5在胰腺癌CAF中高表达,MFAP5可通过激活AKT通路调控胰腺癌细胞增殖与侵袭,MFAP5的表达水平可作为胰腺癌预后评判的指标。
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单位皖南医学院第一附属医院