miR-181c通过靶向抑制RECK促进人A549细胞的迁移及微血管形成

作者：刘翠华; 赵方新; 孙鹏; 韩文杰; 红梅; 武建强; 张烜^*

来源：细胞与分子免疫学杂志, 2022, 38(12): 1084-1090.

DOI：10.13423/j.cnki.cjcmi.009506

• miR-181c
• 反向诱导富含半胱氨酸蛋白(RECK)
• A549肺癌细胞
• 细胞迁移
• 微血管形成

目的 探讨miR-181c对肺癌细胞迁移及微血管形成的影响。方法 利用癌症转录组数据分析网站UALCAN分析TCGA数据库中肺癌miR-181c和带有Kazal基序的反向诱导带有Kazal基序的反向诱导富含半胱氨酸蛋白(RECK)基因表达，miRNA靶基因预测网站Targetscan预测其靶向关系；将miR-181c模拟物、抑制物及阴性对照物转染至A549细胞，实时定量PCR检测RECK mRNA的表达，Western blot法检测RECK、基质金属蛋白酶2(MMP2)和MMP9蛋白表达；TranswellTM检测细胞迁移能力；ELISA检测培养液中血管内皮生长因子A(VEGF-A)的分泌，用培养上清液处理人脐静脉内皮细胞(HUVEC),体外小管形成实验检测微血管形成；双荧光报告基因实验验证miR-181c与RECK基因的直接靶向关系。结果 相对于正常组织，肺癌组织中miR-181c显著高表达，而RECK显著低表达；Targetscan预测表明miR-181c在RECK的3′非翻译区(3′-UTR)有结合域；miR-181c下调RECK的表达，而上调MMP2、 MMP9的蛋白表达；促进A549细胞迁移和VEGF-A分泌，A549细胞培养上清液增强HUVEC分化成管的能力；双荧光报告基因实验证实RECK是miR-181c的直接作用靶点。结论 miR-181c可直接靶向RECK促进人A549肺癌细胞的迁移及微血管形成。

• 单位
  基础医学院; 内蒙古医科大学