含HPV16型反义E7基因的重组腺相关病毒rAAV-HPV16E7AS的包装、纯化及鉴定

作者:邬素芳; 易诚青; 李静; 李辅军; 卢运萍; 马丁
来源:中国生物制品学杂志, 2007, (05): 330-332.
DOI:10.3969/j.issn.1004-5503.2007.05.005

摘要

目的利用重组腺相关病毒载体系统,包装含HPV16型反义E7基因重组腺相关病毒rAAV-HPV16E7AS,并进行纯化及鉴定。方法利用磷酸钙沉淀法,将腺相关病毒载体系统共转染入病毒包装细胞293细胞中,分别合成rAAV-HPV16E7AS和rAAV-lacZ,用斑点杂交法测定重组病毒的滴度,并用重组病毒感染293细胞测定其转染效率。结果所构建的rAAV-HPV16E7AS和rAAV-lacZ滴度均为1.0×1010个病毒分子/ml,平均转染效率为75%。结论已成功构建rAAV-HPV16E7AS,为临床预防和治疗子宫颈癌提供新的手段。

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