吉西他滨诱导膀胱癌T24细胞自噬的实验研究

作者：黄小龙; 张浩; 谢香雨; 杨潇宇; 何卫阳

来源：第三军医大学学报, 2017, 39(01): 9-15.

DOI：10.16016/j.1000-5404.201607106

• 吉西他滨
• T24细胞
• 凋亡
• 自噬
• JNK
• 化疗敏感性

目的观察吉西他滨(gemcitabine,GEM)处理膀胱癌T24细胞后引起凋亡的同时是否诱导T24细胞自噬的产生,并初步探究其自噬产生的机制,以及自噬与凋亡之间的关系。方法体外培养T24细胞,应用CCK-8法测定细胞抑制率;Western blot检测凋亡相关蛋白Caspase-3、PARP的活化,自噬标志蛋白LC3-Ⅱ、底物蛋白P62和自噬潮,以及JNK通路相关蛋白Jnk1、P-Jnk、Bcl-2的表达情况;并通过透射电镜观察细胞超微结构自噬体的变化;Annexin V-PI双流式细胞术检测抑制自噬后细胞凋亡率的变化情况。结果 CCK-8检测结果显示吉西他滨能有效抑制膀胱癌T24细胞增殖;1.0μg/mL吉西他滨处理T24细胞4 h即可发生明显的自噬,透射电镜观察可见自噬体小体的形成;Western blot检测结果显示吉西他滨作用T24细胞后cleaved-Caspase-3、PARP和LC3-Ⅱ表达增高,P62表达降低;P-Jnk出现活化,Bcl-2发生降解;而抑制自噬后能显著增强吉西他滨诱导的膀胱癌T24细胞的凋亡。结论吉西他滨介导膀胱癌T24细胞凋亡的同时又诱导保护性自噬,JNK信号通路参与调控其自噬的发生,抑制自噬可以明显增强膀胱癌T24细胞对吉西他滨的化疗敏感性。

• 单位
  重庆医科大学; 重庆医科大学附属第一医院