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摘要
旨在验证NGF基因在转录组测序中单羔组对多羔组上调的结果，并探究NGF基因对黔北麻羊产羔性状的影响。选取健康、体质量45 kg、4岁左右的单、多羔黔北麻羊母羊为研究对象，采用qPCR法检测NGF基因在单、多羔组黔北麻羊母羊不同组织的表达水平，构建pEGFP-N3-NGF重组质粒，利用脂质体转染法转染pEGFP-N3-NGF重组质粒进入卵巢颗粒细胞，分为超表达NGF试验组和pEGFP-N3空载体对照组，通过检测培养基中雌二醇、孕酮的浓度，及对卵巢颗粒细胞增殖、凋亡、NGF、GnRHR、FSHR、BMP4、TIMP3基因mRNA表达的影响，来探究NGF基因对卵巢颗粒细胞的影响。结果表明，NGF基因在黔北麻羊各组织中均有表达，组间比较可知，卵巢和输卵管在多羔组表达极显著高于单羔组(P<0.01)。成功将pEGFP-N3-NGF重组质粒转染进入卵巢颗粒细胞，在12 h对E2的分泌具有显著促进作用(P<0.05),而对P4的分泌在12,24 h具有显著抑制作用(P<0.05),对卵巢颗粒细胞增殖在24,48 h具有极显著抑制作用(P<0.01),对卵巢颗粒细胞的凋亡具有促进作用。而对繁殖相关基因GnRHR、FSHR、BMP4、TIMP3 mRNA的表达有极显著促进作用(P<0.01)。综上表明，NGF基因可提高E2的分泌，抑制P4的分泌，有助于黔北麻羊发情及妊娠的维持，抑制细胞增殖，促进细胞凋亡，也极显著促进繁殖相关基因mRNA的表达，而这些繁殖相关基因都能够调控卵泡数、卵泡的发育与形成以及排卵，因此，NGF基因能够促进这些基因表达，进而促进卵泡的发育、形成及排卵，提高山羊的产羔力，这为产羔性状相关基因的研究提供了理论基础，初步认为NGF基因可作为探究影响山羊产羔性状的候选基因。
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单位动物科学学院; 贵州大学
