大鼠微管相关蛋白4重组腺病毒载体的构建及在细胞中的表达鉴定

作者：房亚东; 徐雪; 党永明; 郑霁; 张西联; 张家平; 陈渝; 张琼; 黄跃生

来源：第三军医大学学报, 2006, (09): 880-882.

DOI：10.16016/j.1000-5404.2006.09.005

• MAP4
• 腺病毒
• cDNA
• 微管相关蛋白 MAP4
• adenovirus
• microtubule associated protein

目的构建大鼠微管相关蛋白4(m icrotubu le-ossoc iated prote in 4,MAP4)重组腺病毒载体,并转染新生大鼠体外培养的心肌细胞进行表达和鉴定,为真核表达及有关实验研究提供基础。方法设计1对引物,应用逆转录多聚酶链式反应(RT-PCR)技术,从大鼠心肌细胞总mRNA中扩增出MAP4 cDNA,并将MAP4 cDNA克隆到腺病毒穿梭质粒pShuttle2中,构建pShuttle2-MAP4表达质粒。将此表达质粒扩增纯化酶切获得含有目的片段MAP4 cDNA的表达盒与Ad-eno-X V iru l DNA重组并线性化后转染HEK293T细胞,包装产生大鼠MAP4重...

• 单位
  中国人民解放军成都军区总医院; 第三军医大学西南医院; 创伤、烧伤与复合伤研究国家重点实验室